溶血性曼氏桿菌PCR檢測(cè)試劑盒使用方法

溶血性曼氏桿菌PCR檢測(cè)試劑盒使用方法:
一、溶血性曼氏桿菌PCR檢測(cè)試劑盒樣品 RNA 的制備
1、用自選方法抽提病毒樣品 RNA。注意：可以選用本公司生產(chǎn)的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二：RT（逆轉(zhuǎn)錄）反應(yīng)合成 cDNA
1. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系（20 μL 體系）
2. 70℃保溫 5 分鐘變性模板后立即冰浴。
3. 嚴(yán)格按順序加入 6μL RT Buffer（含 dNTP）和 2μL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），
反應(yīng)終體積為 20μL。
4. 42℃保溫 60 分鐘。此步為 RT 反應(yīng)。
5. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應(yīng)，然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作為 PCR 模板使用，丌需要純化。

標(biāo)本的保存
一般說來，在 5 天內(nèi)測(cè)定的標(biāo)本可放置于 4℃，超過一周測(cè)定的需低溫凍存。 對(duì)收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測(cè)的標(biāo)本，儲(chǔ)存在 4 ℃ 備用，如有特殊原因需要周期收集標(biāo)本，將標(biāo)本及時(shí)分裝后放在 -20 ℃ 或 -70 ℃ 條件下保存。避免反復(fù)凍融。標(biāo)本 2 -8 ℃ 可保存 48 小時(shí)， -20 ℃ 可保存 1 個(gè)月。 -70 度可保存 6 個(gè)月。部分標(biāo) 本也可加入適當(dāng)防腐劑，激素類標(biāo)本需添加抑肽酶。

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