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              豬托克特諾病毒PCR檢測試劑盒反應五要素

              更新時間:2021-10-20      點擊次數:1094

              豬托克特諾病毒PCR檢測試劑盒反應五要素:

              參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

              引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:

              ①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。

              ②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。

              ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

              ④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。

              ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。

              ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

              ⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。

              引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。

              干擾素誘導蛋白AIM2抗體

              水通道蛋白-2抗體

              腫瘤抑制基因ABI2/精氨酸酪氨酸蛋白激酶結合蛋白抗體

              ADP核糖基化因子樣11抗體

              ARM重復X連鎖蛋白ARMCX3抗體

              ARM重復X連鎖蛋白ARMCX1抗體

              ARM重復X連鎖蛋白ARMCX2抗體

              自噬相關蛋白10抗體

              酰基輔酶A結合結構域蛋白6抗體

              氨基酰化酶1抗體

              脂肪甘油三酯脂酶抗體

              磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1抗體

              雙調蛋白(結腸直腸細胞源性生長因子)抗體

              磷酸化水通道蛋白2抗體

              粘附相關激酶抗體

              磷酸化粘附相關激酶抗體

              磷酸化蛋白激酶B抗體

              磷酸化水通道蛋白2抗體

              磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體

              磷酸化蛋白激酶B抗體

              磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體

              磷酸化活化轉錄因子4抗體

              磷酸化雄激素受體抗體

              磷酸化雄激素受體抗體

              磷酸化蛋白激酶AKT1,2,3抗體


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