柯薩奇病毒型變種PCR檢測試劑盒說明書

技術原理：
 DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動子的參與下，根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
       在聚合酶鏈式反應實驗中發現，DNA在高溫時也可以發生變性解鏈，當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復性，并設計引物做啟動子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。（ DNA高溫變性低溫復性）
       發現耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個循環加酶，使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本，PCR技術得以大量應用，并逐步應用于臨床。

注意事項：1．基礎程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時間；4．循環次數；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術的基本原理；7．PCR的反應動力學；8．PCR擴增產物；9．PCR反應體系與反應條件。

原理是由一對引物介導，能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增，經過n個熱循環擴增，擴增產物中所含特定基因數是原始模板數的(1+E)n(0＜E＜1,擴增效率＝倍，使得檢測擴增產物中的特定基因成為可能。
 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性；
?
實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

C-型凝集素域家族11成員A(CLEC11A)重組蛋白英文名稱：Recombinant C-Type Lectin Domain Family 11, Member A (CLEC11A)

大鼠腎小管平滑肌細胞*培養基蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensis

BETA-SSA瓊脂/BETA-SSA Agar鏈球菌的選擇性分離培養250克國產/進口

小鼠角膜內皮細胞*培養基100mL

MDA-MB-415(人腺細胞)淡紫灰鏈霉菌綠色變種 Streptomyces lavendulae var. viridis

桿菌屬 Lactobacillus sp.ME-180(人頸表皮細胞)

SK-Hep-1(人肝細胞)5×106cells/瓶×2

PK-15(豬腎細胞)釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

假單胞分離瓊脂/Pseudomonas Isolation Agar假單胞菌群的測定250克國產/進口

HA標簽免疫親和介質小鼠單核巨噬細胞白血病細胞

Ponceau Stain Reagent/麗春紅染色試劑500ml100ml、500mlgersion

柯薩奇病毒型變種PCR檢測試劑盒說明書2-羥乙吡  123.15  2- 2-hydroxyethyl-pyridine*：103-74-2分子量： C7H9NO

延胡索乙素  Tetrahydropalmatine  355.4275分子量：C21H25NO4*：2934-97-6

2-溴喹啉  208.06  2- bromide*：2005-43-8分子量： C9H6BrN

1-乙-7-硝-1,2,3,4-四氫喹啉  206.24  1- ethyl -7- nitro -1,2,3,4- four*：57883-28-0分子量： C11H14N2O2

2-(2′-羥-4′-甲酸)-5氯-2H-并三唑    2- (2 '- -4' - hydroxy benzoic acid phenyl) -5 chloro -2H- benzo triazole three*：分子量：

氯  112.56  Chlorobenzene*：108-90-7分子量： C6H5Cl

紫蘇醛  Perilla aldehyde  150.22分子量：C10H14O*：18031-40-8

氯代正丁烷  Chlorinated butyl  92.57分子量： C4H9Cl*：109-69-3

2,2-雙二羥(Bis-tris)  2,2- double dimethylol aniline (Bis-tris)  209.24分子量： C8H19NO5*：6976-37-0

N,N-雙(2-羥乙)甘氨（Bicine）  N, N- bis (2- hydroxyethyl) glycine (Bicine)  163.17分子量： C6H13NO4*：150-25-4

紫云英苷  Astragalin  448.38分子量：C21H20O11*：480-10-4