人膚蠅PCR檢測試劑盒規(guī)格

原理是由一對引物介導，能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增，經過n個熱循環(huán)擴增，擴增產物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0＜E＜1,擴增效率＝倍，使得檢測擴增產物中的特定基因成為可能。
 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性；

注意事項：1．基礎程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術的基本原理；7．PCR的反應動力學；8．PCR擴增產物；9．PCR反應體系與反應條件。

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實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

技術原理：
 DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動子的參與下，根據(jù)堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
       在聚合酶鏈式反應實驗中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈，當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復性，并設計引物做啟動子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。（ DNA高溫變性低溫復性）
       發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個循環(huán)加酶，使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本，PCR技術得以大量應用，并逐步應用于臨床。

V79(倉鼠肺細胞)木耳 Auricularia auricula

Ampicillin(100mg/ml,1000X)鬼傘屬 Bradyrhizobium vigna

小鼠色素瘤細胞英文名稱：b16

植物桿菌 Lactobacillus plantarumKU812(人外周血嗜堿性白血病細胞)

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae金橫裂鏈霉菌 Streptomyces aureosegmentosus

支原體肉湯培養(yǎng)基基礎/Mycoplasma Broth Base禽胚組織制備的疫苗支原體檢測40克國產/進口

Caki-1(人腎透明細胞細胞)5×106cells/瓶×2

豇豆慢生瘤菌 Bradyrhizobium vignaCT26.WT(小鼠結腸細胞)

肉桂紫正青霉 Eupenicillium cinnamopurpureumMolt-4(人急性淋巴母細胞白血病細胞)

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae鏈霉菌 Streptomyces sp.

CCAAT增強子結合蛋白β(CEBPβ)重組蛋白英文名稱：Recombinant CCAAT/Enhancer Binding Protein Beta (CEBPb)

人膚蠅PCR檢測試劑盒規(guī)格補體1抑制因子(C1INH)重組蛋白  Recombinant Complement 1 Inhibitor (C1INH)

阻抑素(PHB)重組蛋白  Recombinant Prohibitin (PHB)

費氏中華瘤菌 Sinorhizobium frediiWestern Blot封閉Ⅱ(奶粉,pH7.5)/Blocking Buffer(milk)

NCI-H2087(人非小細胞肺腺細胞)5×106cells/瓶×2

天藍色鏈霉菌 Streptomyces coelicolor釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

胰酪胨大豆瓊脂/胰酶大豆瓊脂/胰蛋白胨大豆瓊脂/TSA用于藥品、生物制品的無菌試驗250克國產/進口

TTC卵磷脂吐溫80營養(yǎng)瓊脂/三苯四唑卵磷脂吐溫80營養(yǎng)瓊脂/氯化三苯四氮卵磷脂吐溫80營養(yǎng)瓊脂/紅四氮唑卵磷脂吐溫80營養(yǎng)瓊脂/三苯基氯化四氮唑卵磷脂吐溫80營養(yǎng)瓊脂/TTC Lecithin Tween 80 Nutrient Agar用于化妝品中細菌總數(shù)測定250克國產/進口

鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosus香菇 Lentinula edodes

霍亂雙糖鐵瓊脂/KIA/Kligler Iron Agar用于霍亂、副溶弧菌的分離培養(yǎng)250克國產/進口

豌豆瘤菌 Rhizobium leguminosqrum釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

BEL-7405(人肝細胞)5×106cells/瓶×2