卡薩諾爾森林病病毒PCR檢測試劑盒說明書

注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

原理是由一對引物介導(dǎo)，能在動(dòng)植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增，經(jīng)過n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0＜E＜1,擴(kuò)增效率＝倍，使得檢測擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
?
實(shí)驗(yàn)過程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

小鼠磷脂酶A2(PLA-2)Elisa 試劑盒 96T/48T 試劑盒

小鼠磷脂酶A2(PL-A2)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

小鼠磷酸葡萄糖變位酶(PGM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒

小鼠磷酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA  試劑盒  試劑盒

小鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒

小鼠磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(pERK)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

小鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

小鼠磷酸化氨基末端蛋白激酶(P-JNK)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

小鼠淋巴細(xì)胞因子ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

小鼠淋巴細(xì)胞趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

小鼠淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

小鼠淋巴球性脈絡(luò)叢腦膜炎病毒抗體（LCM-Ab）ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒

小鼠粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

小鼠粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

卡薩諾爾森林病病毒PCR檢測試劑盒說明書mRNA結(jié)合蛋白抗體 規(guī)格： 0.2ml  英文名稱：RAE1

Ras特異性鳥嘌呤核苷酸釋放因子1 規(guī)格： 0.2ml  英文名稱：RASGRF1

染色體濃縮調(diào)節(jié)蛋白2抗體 規(guī)格： 0.2ml  英文名稱：RCC2

胰癌轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白RLLM1抗體 規(guī)格： 0.2ml  英文名稱：RLLM1

環(huán)指蛋白156抗體 規(guī)格： 0.2ml  英文名稱：RNF156

磷酸化Rho相關(guān)蛋白激酶1抗體 規(guī)格： 0.1ml  英文名稱：phospho-ROCK1(Thr455+Ser456)

受體結(jié)合絲氨酸蘇氨酸激酶2抗體 規(guī)格： 0.2ml  英文名稱：RIP2

類固醇硫酸酯酶抗體 規(guī)格： 0.1ml  英文名稱：Steroid sulfatase

離子轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)蛋白SLC7A9抗體 規(guī)格： 0.2ml  英文名稱：SLC7A9

絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶p38γ抗體 規(guī)格： 0.1ml  英文名稱：SAPK3

可溶性載質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2B1抗體 規(guī)格： 0.2ml  英文名稱：SLCO2B1

三碘甲狀素T3抗體 規(guī)格： 0.2ml  英文名稱：T3

磷酸化肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白2抗體 規(guī)格： 0.1ml  英文名稱：phospho-ARP2 (Thr237)

膜型絲氨酸蛋白酶2抗體 規(guī)格： 0.2ml  英文名稱：TMPRSS4

磷酸化酪氨酸激酶A抗體 規(guī)格： 0.1ml  英文名稱：Phospho-TrkA (Tyr785)+TrkB (Tyr816)

技術(shù)原理：
 DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
       在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈，當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性，并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。（ DNA高溫變性低溫復(fù)性）
       發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個(gè)循環(huán)加酶，使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時(shí)也大大降低了成本，PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用，并逐步應(yīng)用于臨床。