土壤β木糖苷酶 （SβXYS）測試盒熒光法

特別提醒：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測。

產(chǎn)品名稱：土壤β木糖苷酶 （SβXYS）測試盒熒光法

產(chǎn)品規(guī)格：100管/96樣

檢測方法：熒光法

產(chǎn)品貨號：BK-01S6886

產(chǎn)品分類：土壤系列
商品介紹：

所需的儀器和用品：

可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶（SOD）的測定：

建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測定，了解本批樣品情況，熟悉實(shí)驗(yàn)流程，避免實(shí)驗(yàn)

樣本和試劑浪費(fèi)！

1、樣本制備

實(shí)驗(yàn)方法學(xué)：

一、肝素的配制：

市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。

肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉(zhuǎn)動(dòng)，每隔5～10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集：

全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí)，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時(shí)，直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

選擇抗凝的注意點(diǎn)：

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

50mL Cobalt Chloride Solution（氯化鈷溶液）,0.5M Cobalt Chloride Solution,0.5M 常溫保存

25uL Fluorescein -12- dUTP溶液 (1mM) Fluorescein -12- dUTP Solution -20℃避光保存

2 ug pIC111 pIC111 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

指示選擇性基礎(chǔ) Direct selective medium-based 250g

1瓶 JeKo-1細(xì)胞株 JeKo-1 低溫運(yùn)輸和保存

2.5L微需氧產(chǎn)氣包  10個(gè)/包

1000µg RecA蛋白 RecA -20℃保存

500mL Sodium Phosphate Buffer（鈉緩沖液）,0.2M,pH8.0  Sodium Phosphate Buffer,0.2M,pH8.0  常溫保存

1 管 SMD1168酵母菌 SMD1168 Yeast Strain -80℃保存

2 ug pSI pSI 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

120mL 氣相RNase清除劑 Air RNase Erasol 常溫

土壤β木糖苷酶 （SβXYS）測試盒熒光法Goat Anti-Mouse IgG/Bio  標(biāo)記的羊抗小鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml

NRXN3  軸突蛋白3抗體 規(guī)格: 0.1ml

CCL26/Eotaxin 3  嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白3抗體 規(guī)格: 0.2ml

Goat Anti-Mouse IgG/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標(biāo)記的羊抗小鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml

EphB2/Eph receptor B2  酪蛋白激受體B2抗體 規(guī)格: 0.1ml

REG1A  胰島細(xì)胞再生因子ICRF抗體 規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-Guinea pig IgM/PE-Cy3  PE-Cy3標(biāo)記的兔抗豚鼠IgM 規(guī)格: 0.1ml

T4/L-Thyroxine  甲狀素T4抗體 規(guī)格: 0.2ml

LRP5  脂蛋白受體相關(guān)蛋白5抗體 規(guī)格: 0.1ml

NALP6  富含亮重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體 規(guī)格: 0.2ml

SEMA6D  軸突導(dǎo)向因子SEMA6D抗體 0.2ml

CPT1B  肉毒堿棕櫚酰基轉(zhuǎn)移1B抗體 規(guī)格: 0.2ml 

注意事項(xiàng)：

1、試劑二為酶，不可冷凍，使用時(shí)在冰上放置。

2、對照管只需要做一管。

3、若對照管吸光值大于2，建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用（10μl試劑二原液+60μl蒸餾水）。

4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管，對照管數(shù)值在什么范圍？

對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是（1）試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用；（2)沒有按順序加試劑；（3）反應(yīng)時(shí)間不夠，可以延長反應(yīng)時(shí)間（反應(yīng)時(shí)間30min可以延長到40min）。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

若出現(xiàn)測定管大于對照管，可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大，為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測，通常可以使測定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。