ATP酶測試盒測普通組織勻漿的

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儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現性好：變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素小：干擾因素少，重復性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等，效果均佳。
AGO2 Others Mouse 小鼠 AGO2 / Argonaute 2 / EIF2C2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 坦索羅辛質量規格：美國進口tamsulosin

人胚胎肺成纖維細胞;WI-38(S)-坦索羅辛鹽酸鹽質量規格：美國進口(S)-Tamsulosin

PIEC細胞，豬髖動脈內皮細胞 人結腸癌細胞,T84細胞 CM-H061人腎小球內皮細胞*培養基100mL替米沙坦-d3質量規格：美國進口Telmisartan-d3

大鼠胰島細胞瘤細胞;INS-1替米沙坦酰基-β-D-葡萄糖苷酸-d3質量規格：美國進口Telmisartan-d3 Acyl-β-D-glucuronide

RK1 Others Human 人 kA / RK1 人細胞裂解液 (陽性對照) 硫酸小檗堿（標準品）質量規格：HPLC≥98%，標準品Berberine hydrogen sulphate
RL1(大鼠肺成纖維樣細胞) 5×106cells/瓶×2 JAR(胚絨毛癌細胞)ConA刀豆凝集素A5毫克BR，100-200u/mg

CL-0140LLC(小鼠肺癌細胞)5×106cells/瓶×2頭孢安芐 Cqphclqxin 12686-71-

IFNAR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 人細胞裂解液 (陽性對照) 0.5ml凍存管容量：5毫克

人腎小球內皮細胞裂解物HRGECL寶石橙蛋白染色試劑，英文名或英文縮寫：SYPRO orange protein stain，級別：BS，規格：100克

A2780細胞，人卵巢癌細胞 鮭魚胚胎細胞,CHSE細胞 腦微血管內皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)(乙酰丁香酮)
MG-63細胞，人成骨肉瘤細胞 單增李斯特氏菌 表達小鼠MHCⅠ類分子Kb的人胚腎細胞;293KBHydrindantindihydrate還原茚三酮二水合物100毫克生物技術級，5/240mg

TM4(正常小鼠Sertoli細胞) 5×106cells/瓶×23.4-二基本酚 3,4-Dimqthylphqnol 92-62-8

Hs 746T(人胃癌細胞) 5×106cells/瓶×2 COS-7L, 非洲綠猴腎成纖維細胞 腺病毒轉化的人胚腎細胞;AAV-293Goldoxide氧化高金250毫升AR，99%

人干細胞因子單克隆抗體細胞株;AMS2(SCF3)亞嶙酸三丁酯100克RT

CD6 Others Rat 大鼠 CD6 / TP120 人細胞裂解液 (陽性對照) 2150-48-3吡羅紅BCI 45010
ATP酶測試盒測普通組織勻漿的CDK7 & CCNH & MNAT1 Others Human 人 CDK7 & CCNH & MNAT1 Heteroimer 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 丁二1(>98%,BR)Succinic anhydride質量規格：>98%,BR

615小鼠T細胞性白血病瘤株;L7912吐溫60Tween-60質量規格：BR

Eca-109細胞，食管癌細胞 人食管鱗癌,KYSE 150細胞 中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS5A酵母多糖 A(>98% (HPLC),BC)Zymosan A from Saccharomyces cerevisiae質量規格：>98% (HPLC),BC

小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-C4硫酸鈣(>99%,BR)Calcium sulfate, anhydrous質量規格：>99%,BR

HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/California/07/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) 二環己基碳二亞胺(>99%,BR)DCC, Dicyclohexylcarbodiimide質量規格：>99%,BR
實驗通用規則：
1、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應盡量避免接觸。
4、檢測前，要打開酶標儀，使之穩定10分鐘以上。
5、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。
7、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，防止水分的蒸發。
8、洗板時，每次洗液加入后，應靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的，要在臨用前現配。