顯色法，冰凍切片

儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質(zhì)破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發(fā)送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規(guī)定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發(fā)，板上應加蓋，或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質(zhì)以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
優(yōu)點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素小：干擾因素少，重復性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等，效果均佳。
實驗通用規(guī)則：

ERBB3 Others Human 人 ErbB3 / HER3 人細胞裂解液 (陽性對照) 延胡索乙素；消旋延胡索乙素(標準品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,BRTetrahydropalmatine

小香豬皮膚細胞;SSC-S2延胡索乙素；消旋延胡索乙素質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,BRTetrahydropalmatine

SPN Others Rat 大鼠 SPN / CD43 / Sialophorin 人細胞裂解液 (陽性對照) 孕1醇酮醋酸酯,孕1諾龍乙酸酯質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRPregnenolone Acetate

CL-0165NCI-H1299(人非小細胞肺癌細胞)5×106cells/瓶×2孕1醇酮醋酸酯(標準品)質(zhì)量規(guī)格：>98%,標準品Pregnenolone Acetate

L129細胞，NCTC克隆929細胞 人Butt`s瘤細胞,Raji細胞 小鼠小膠質(zhì)細胞;BV2靈芝醛A(標準品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥95%,標準品Ganoderal A
人甲狀腺濾泡上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL氧化鈣(塊)(>98%，BR)質(zhì)量規(guī)格：>98%，BRCalcium oxide lump

Malmc細胞，人皮膚纖維微細胞系 光滑念珠菌 雜交瘤(B類);IB3C10H12A12G2H8F31酸二氫鈣一水(85%~95%,BR)質(zhì)量規(guī)格：85%~95%,BRCalcium phosphate, monobasic, monohydrate

PPBP Protein Human 重組人 NAP-2 / PPBP / CXCL7 蛋白 (His 標簽)無水硫酸鈉(分析標準品,pestizides≤1 ppm)質(zhì)量規(guī)格：分析標準品,pestizides≤1 ppm sulfate anhydrous

MDA-MB-435S(人導管癌細胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠 PD1 / PDCD1 人細胞裂解液 (陽性對照) 甲嘧磺隆(標準品)質(zhì)量規(guī)格：分析標準品Sulfometuron-methyl

倉鼠卵巢細胞;Lec1西草凈(分析標準品,97%)質(zhì)量規(guī)格：分析標準品,97%Simetryne
TCN2 Others Mouse 小鼠 TCN2 / anscobalamin-II 人細胞裂解液 (陽性對照) Toosendanin苦楝素10毫克超，98%

PA319 人大腸癌細胞二十二醇 1-Docoscnol 661-19-8

CL-0466WI38/VA13(SV-40Z轉(zhuǎn)化肺成纖維細胞)5×106cells/瓶×2L-正纈酸容量：1公斤

小鼠神經(jīng)干細胞(EGFP標記)wo7iumphosphotungstate十二鎢酸嶙酸鈉水合物500克CP，98%

人細胞;1301 人腸動脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基 100mL589-92-44-4-metxylcyclohexanone
顯色法，冰凍切片CM-H013人小氣道平滑肌細胞*培養(yǎng)基100mL奎寧單鹽酸鹽二水合物Quinine  dihydrate質(zhì)量規(guī)格：>99%

MOLT-4細胞，急性母細胞白血病細胞 髓性甲狀腺癌細胞,TT細胞 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細胞(傣族);KM94031--1,2,4-三唑1-METHYL-1,2,4-TRIAZOLE質(zhì)量規(guī)格：>98%

615小鼠T細胞性白血病瘤株;L7712甲啶鉑,吡鉑Picoplatin質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

CD3E Others Human 人 CD3E 人細胞裂解液 (陽性對照) 4-硝基芐瞇鹽酸鹽4-NitrobenziMidaMide HCl質(zhì)量規(guī)格：>97%

人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細胞;HK-2脲,尿素Urea質(zhì)量規(guī)格：AR

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