線粒體/細胞核提取試劑盒

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儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現性好：變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素小：干擾因素少，重復性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等，效果均佳。
FaDu細胞，人咽鱗癌細胞 人細胞與倉鼠肺細胞雜交細胞,FD4細胞 CL-0379MCF 7B(人癌細胞)5×106cells/瓶×2H-Ser-OmeoHClL-絲酸鹽酸鹽5克特，98%

中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ1 Cdna-TGF-β1 Dinding Protein cDNA1,4-二異炳基本 97% 1,4-DIISOPROPYLBqNZqNq 100-18-2

IL1RAPL1 Others Human 人 IL-1R8 人細胞裂解液 (陽性對照) 隊羌基肉桂醋酯 Mqthyl 4-xy7noxycinncmctq 3943-97-3

A-375 [A375], 人惡性素瘤細胞株Fmoc-D-Trp-OHN-芴甲氧羰基-D-色酸100克特，99%

NINJ1 Others Rat 大鼠 Ninjurin-1 / NINJ1 人細胞裂解液 (陽性對照) 9000-90-2ALPHA-淀粉酶alpha-Amylase
HPrSMC-c 人類前列腺平滑肌細胞(HPrSMC) 500,000cells 原代神經膠質細胞特制基礎培養基Many types of cells包裝：500/250/100mlABEI；N-（4-氨丁基）-N-乙基異魯米諾質量規格：>97%,進分N-(4-Aminobutyl)-N-ethylisoluminol

腸靜脈內皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)TTAC；十四烷基基氯化銨質量規格：>99%,ARTetradecyltrimethylammonium chloride

TNFSF11 Others Cynomolgus 食蟹猴 RANKL / OPGL / TNFSF11 人細胞裂解液 (陽性對照) 腺嘌呤質量規格：>98%,BRAdenine

人小細胞肺癌細胞;NCI-H209腺嘌呤（標準品）質量規格：HPLC>98%,標準品Adenine

貓腎細胞;CRFK 人胚腎細胞,293[HEK-293]細胞 Fox-NY細胞，小鼠骨髓瘤細胞琥乙紅霉素質量規格：potency>765 µg of erythromycin (C37H67NO13) per mg,USP35Erythromycin ethylsuccinate
PROCR Others Cynomolgus 食蟹猴 Epcr / PROCR 人細胞裂解液 (陽性對照) NP-40LYSISBUFFERNP-40裂解液#N/A500ML#N/A

正常小鼠Leydig細胞;TM3偏釩醋銨;釩醋銨;二縮原釩醋銨 cMMoniuM Mqtcvcncdctq;cMMoniuM Monovcncdctq;cMMoniuM vcncdctq(V) 7803-22-6

LTEP-sm細胞，人小細胞肺癌細胞 小鼠皮膚細胞,JB6-C41細胞 CL-0122HUVEC(HUV-EC-C) (人臍靜脈血管內皮細胞)5×106cells/瓶×2Indazole1,2-二氮雜茚500克CP，98%

TE-1(人食管癌細胞) 5×106cells/瓶×2咪康唑5克RT

HUtMEC-c 人微血管內皮細胞(HUtMEC) 500,000cells 臍靜脈內皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)(2-)甘酸)
線粒體/細胞核提取試劑盒P3X63Ag8(小鼠骨髓瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 SARS 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 來那替尼Neratinib(HKI-272)質量規格：>98.5%,BR,可用于細胞培養

人腎上腺皮質癌細胞;SW-13原薯蕷皂苷(標準品)Methyl Protodioscin質量規格：HPLC≥98%，標準品

ADAM8 Others Cynomolgus 食蟹猴 ADAM8 人細胞裂解液 (陽性對照) 纖細薯蕷皂苷(標準品)Gracillin質量規格：HPLC≥98%，標準品

CL-0457TT(人甲狀腺導管癌細胞)5×106cells/瓶×2鹽酸育亨賓Yohimbine HCl質量規格：>98%,BR

L-6TG細胞，肌母細胞 人前列腺癌細胞,JCA-1細胞 人胚肺成纖維細胞;MRC-5鹽酸育亨賓（標準品）Yohimbine HCl質量規格：HPLC≥98%，標準品
實驗通用規則：
1、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應盡量避免接觸。
4、檢測前，要打開酶標儀，使之穩定10分鐘以上。
5、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。
7、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，防止水分的蒸發。
8、洗板時，每次洗液加入后，應靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的，要在臨用前現配。