APES

儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現性好：變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素小：干擾因素少，重復性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等，效果均佳。
實驗通用規則：

hMSC-BM Pellet 人類骨髓間質干細胞團塊 > 1 mio.cells 人肺微血管內皮細胞總RNAHPMEC NA匹格列酮（標準品）質量規格：HPLC>98%,標準品Pioglitazone base

CM-M118小鼠虹膜色素上皮細胞*培養基100mL匹格列酮鹽酸鹽質量規格：>98.5%Pioglitazone HCl

IL3RA Others Canine 狗 IL3RA 人細胞裂解液 (陽性對照) 滅菌丹標準溶液(10μg/ml,u=6%)質量規格：10μg/ml,u=6%N-(Trichloromethylthio)phthalimide solution

間充質干細胞培養基MSCM-sf-prf惡草酮(分析標準品,97.5%)質量規格：分析標準品,97.5%Oxadiazon

SW480[SW-480]細胞，人結腸癌細胞 人胚腎上皮包裝細胞,GP2-293Luc細胞 原代上皮細胞培養特制添加劑Many types of cells包裝：5/2.5/1ml嘧啶1(10μg/ml,u=3%)質量規格：10μg/ml,u=3%Pirimiphos-methyl solution
C127 小鼠細胞 102(>97.0%(HPLC)(N))質量規格：>97.0%(HPLC)(N)Coumarin 102

FCGR3A Others Human 人 CD16a / FCGR3A 人細胞裂解液 (陽性對照)  314(>98.0%(HPLC)(N))質量規格：>98.0%(HPLC)(N)Coumarin 314

大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(高分化);PC-12(高分化)異環1酰胺質量規格：>99%,USP,BR,可用于細胞培養Ifosfamide

IL10RB Others Mouse 小鼠 IL10RB / IL10R2 人細胞裂解液 (陽性對照) 異環1酰胺（標準品）質量規格：HPLC>98%,標準品Ifosfamide

KYSE450 食管癌鹽酸普拉克索質量規格：>99%,EP6.8Pramipexole 2HCL monohydrate
水牛皮膚成纖維樣細胞;WB-S3白術內酯Ⅰ（標準品）質量規格：HPLC≥98%，標準品Atractylenolide I

人腎皮質上皮細胞(HRCEpiC)( 5×105 )白術內酯III（標準品）質量規格：HPLC≥98%，標準品Atractylenolide III

CL-0195RH-35(大鼠肝癌細胞)5×106cells/瓶×2白頭翁皂苷B4（標準品）質量規格：HPLC≥98%，標準品Anemoside B4

人食管癌細胞;EC109 大鼠腦成纖維細胞*培養基 100mL百秋李醇質量規格：TLC≥98%，標準品Patchouli alcohol

PC-12(低分化) 大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(低分化)白樺脂醇質量規格：>98%,BRBetulin
APESXCL1 Protein Mouse 重組小鼠 XCL1 蛋白 (His 標簽)羅漢樹脂酚-4'-O-β-龍膽二糖苷(標準品)Matairesinol 4'-O-β-gentiobioside質量規格：HPLC≥98%,標準品

RBE(人膽管癌細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 IFNA5 / IFNaG 人細胞裂解液 (陽性對照) 石蕊Litmus質量規格：AR

人小細胞肺癌細胞;NCI-H2097-O-蘆薈新甙A(標準品)7-O-Methylaloeresin A質量規格：HPLC≥98%,標準品

PTGFRN Others Cynomolgus 食蟹猴 EWI-F / PTGFRN 人細胞裂解液 (陽性對照) 肉蓯蓉苷A(標準品)Cistanoside A質量規格：HPLC≥98%,標準品

CL-0449SW 780(人膀胱移行細胞癌)5×106cells/瓶×2蘆薈新甙D(標準品)Aloeresin D質量規格：HPLC≥98%,標準品

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