胃蛋白酶Pepsin

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儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現性好：變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素小：干擾因素少，重復性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等，效果均佳。
HPrSMC Pellet 人類前列腺平滑肌細胞團塊 > 1 mio.cells 人星形膠質細胞cDNAHA cDNA芝麻素質量規格：HPLC≥98%，BRSesamin

CL-0106HFL1(人肺成纖維細胞)5×106cells/瓶×2芝麻素(標準品)質量規格：HPLC≥98%,標準品Sesamin

KIR2DL4 Others Human 人 KIR2DL4 / CD158D CHO細胞裂解液 (陽性對照) 槲皮素-3-O-葡萄糖-7-O-鼠李糖苷(標準品)質量規格：HPLC≥98%,標準品Quercetin 3-O-glucoside-7-O-rhamnoside

人表皮色素細胞-淺色素裂解物HELM-l L知母皂苷A3(標準品)質量規格：HPLC(ELSD)>97%，標準品Timosaponin A3

新生牛眼晶體上皮細胞;NBLE 人甲狀腺癌細胞，SW579細胞 RIN-m5F細胞，小鼠β瘤細胞正十五烷（標準品）質量規格：內標N-PENTADECANE
大鼠腎系膜細胞;RMC棕櫚酸乙酯(standard for GC,≥99%(GC))質量規格：standard for GC,≥99%(GC)Ethyl palmitate

SMAD5 Others Mouse 小鼠 Smad5 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 異辛酸(Standard for GC,≥99.5%(GC))質量規格：Standard for GC,≥99.5%(GC)2-Ethylhexanoic acid

肺成纖維細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)吲達帕胺質量規格：>99%,EP6.0,BRIndapamide

人腦微血管內皮細胞 人肺癌細胞，NCI-H520[H520]細胞 SAC-IIB2(腹水瘤細胞)吲達帕胺（標準品）質量規格：HPLC>98%,標準品Indapamide

人導管癌細胞;ZR-75-1帕醇(標準品)質量規格：HPLC>98%,USPIopamidol
人前脂肪細胞-皮下HPA-swo7iumMETABISULFITE焦亞鈉(重亞鈉)ACS級白色粉末RTsigma

ERN1 Others Human 人 ERN1 / IRE1 (aa 465-977) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 二苯基 Diphenylcarbinol,99% 91-01-0 25G 通用試劑

長尾綠猴胚胎細胞;4179碳醋胍;碳醋亞安脲;胍碳醋鹽 Gucnidinq ccronctq 293-82-1

HL-7702細胞，肝細胞 人結腸腺癌細胞,LS180細胞 CM-R037大鼠小腸隱窩上皮細胞*培養基100mLPROTEINMWMARKER,HIGHRANGE蛋白Marker生物技術級液體FROZENsigma

大鼠肺泡巨噬細胞;NR8383[AgC11x3A; NR8383.1]577-11-7多庫酯鈉Docusate wo7ium
胃蛋白酶Pepsin人心肌細胞-心房總RNAHCF-aa NA洛索洛芬鈉(標準品)Loxoprofen 質量規格：含量測定

CD38 Others Cynomolgus 食蟹猴 SCARB3 人細胞裂解液 (陽性對照) 丹皮酚Paeonol質量規格：>98.5%,BR

人大隱靜脈內皮細胞*培養基 100mL丹皮酚(標準品)Paeonol質量規格：HPLC>98%,標準品

Ana-1細胞，小鼠巨噬細胞 WEHI 22.1(B細胞) 小鼠B細胞雜交瘤細胞;SH2羅通定/左旋延胡索乙素/左旋四氫巴馬汀Rotundine/ L-Tetrahydropalmatine質量規格：≥97%,BR

CSF3R Protein Human 重組人 G-CSFR / CD114 / CSF3R 蛋白 (Fc 標簽)利拉萘酯Liranaftate質量規格：>99%,AR
實驗通用規則：
1、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應盡量避免接觸。
4、檢測前，要打開酶標儀，使之穩定10分鐘以上。
5、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。
7、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，防止水分的蒸發。
8、洗板時，每次洗液加入后，應靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的，要在臨用前現配。