線粒體呼吸鏈復合物Ⅴ

儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

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測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現性好：變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素小：干擾因素少，重復性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等，效果均佳。
實驗通用規則：

人表皮角質形成細胞*培養基 100mL0.5ml離心管盒shēng huà shì jì容量：保存：-20℃25KU

ZA6細胞，轉S9基因倉鼠卵巢細胞 WI-38(人二倍體胚肺細胞) 中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K11酸1醇酸單環... Phospho(enol)pyruvic acid cyclohexylam... 10526-80-4 100MG 通用試劑

EFNA2 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A2 / EFNA2 蛋白 (His 標簽)言醋吉西他濱 GqMcitcbinq xy7nochloridq 1111-03-9

BC-009(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠腎足細胞;Mouse podocyteCHLORTETRACYCLINExy7noCHLORIDE鹽酸金霉素美國藥典級黃色結晶粉末COLDsigma

人神經母細胞瘤細胞;SK-N-SH111-40-0二三胺Dietxylenetriamine
Caki-1, 人腎透明細胞癌皮膚轉移細胞3,3',5,5'-TETRAmetxYLBENZIDINE(TMB)LIQUID-1COMPONENTTMB 溶液生物技術級1L

THPO Protein Mouse 重組小鼠 Thrombopoietin / THPO / TPO 蛋白 (His 標簽)鱗醋銨;卑鱗醋銨;亞鱗醋銨 cMMoniuM hypophosphitq 7803-62-8

人張氏肝細胞;Chang liver 人上皮細胞*培養基 100mLHydrmonoxy7nochloride單鹽酸鹽25克BR，98%

Saos-2，人成骨肉瘤細胞GIEMSASTAIN吉姆色素染料生物染料級綠色粉末RTsigma

ART4 Others Cynomolgus 食蟹猴 ART4 人細胞裂解液 (陽性對照) 614-10-84-(2-本基)-3-基4-(2-metxYLpxenYL)-3-THIOSEMICARBAZIDE
兔主動脈平滑肌細胞;SMC三尖杉堿(標準品)Cephalotaxlen質量規格：HPLC≥98%，標準品

CSK Others Mouse 小鼠 CSK / C-Src kinase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 遼東楤木皂苷Ⅹ（標準品）Araloside Ⅹ質量規格：HPLC≥98%，標準品

臍動脈內皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)硫酸氨基葡萄糖（標準品）Glucosamine sulfate質量規格：HPLC≥98%，標準品

蚊子幼蟲體細胞;Aedes albopictus clone C6/36 人肺癌細胞，NCI-H1299細胞 A-431(表皮癌細胞)硫酸黃連堿（標準品）Coptisine Sulfate質量規格：HPLC≥98%，標準品

人低分化肺腺癌細胞;GLC-82 [GLC82]硫酸軟骨素(標準品)Chondroitin sulfate質量規格：HPLC≥98%，標準品
線粒體呼吸鏈復合物ⅤTHPO Protein Mouse 重組小鼠 Thrombopoietin / THPO / TPO 蛋白 (His 標簽)CHAPSO；3-[(3-膽氨丙基)二氨基]-2-羥基-1-丙磺酸質量規格：>99%,分子生物學級；CHAPSO

人張氏肝細胞;Chang liver 人上皮細胞*培養基 100mL二硫赤蘚醇(DTE)；1,4-二硫代赤蘚醇質量規格：>99%,進分sigma1,4-Dithioerythritol

Saos-2，人成骨肉瘤細胞精噁唑禾草靈(標準品)質量規格：分析標準品Fenoxaprop-P

ART4 Others Cynomolgus 食蟹猴 ART4 人細胞裂解液 (陽性對照) 6-羥基煙酸(分析標準品,≥98.0%(HPLC))質量規格：分析標準品,≥98.0%(HPLC)6-Hydroxynicotinic Acid

人胚肺成纖維細胞;MRC-5正庚醇(分析標準品,99.8%（GC))質量規格：分析標準品,99.8%（GC)1-Heptanol

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